手三里位於前臂背面橈側，當陽溪與曲池的連線上，肘橫紋下2寸。手三里長於經絡病的治療，因為它的針刺感應相當強烈，勝於曲池，臨床經常用於治療急性落枕和腰扭傷。《針灸甲乙經》上面有記載：腸腹時寒，腰痛不得臥，手三里主之。還有《通弦指要賦》也記載了肩背患，責肘前之三里。這些詩歌也都是記載了手三里用來治療肌肉急性扭傷的一些記錄，我們再臨床上經常是用手按揉手三里然後讓病人活動疼痛的部位，越疼痛越用力的去按揉，這樣子能把痙攣的肌肉放鬆開，達到治病的療效。
臨床上還有一些報導是關於手三里治療肩周炎的案例，肩周炎指的是肩關節廣泛性的疼痛，活動不利，關節黏連，夜間為甚，逐漸加重，肩關節活動功能受限而且日益加重。多數肩周炎患者的患側手三里穴有明顯的壓痛，故在此針刺、艾灸、穴位注射、學位點按都有治療作用。
高式國老先生對手三里的認識更到位：天氣者，鼻司呼吸，採太空之氣也。地氣者，口納飲食，取水穀之氣也。人氣者，一為先天元氣，一為後天七情變化之氣，及飲食補助之氣。天樞上下，即天樞穴位之上下之處，包括全腹上中下三部。腹部有病，三里統能治之。《針灸大成》言：手足上下針三里，食癖氣塊憑此取。又言：肚腹三里留。皆不專指足三里。只揣針灸諸穴名義，凡以三里、五里命名者，皆以其能治多經病也。
上面那段的話意思是之前我們都一直認為古人說的「肚腹三里留」講的是足三里，其實不是，真正的「三里」，有可能還包括手三里，《針灸大成*席弘賦》雲： 「肩上連臍痛不休，手中三里便須求」等等歌訣，據以推廣，手三里穴治臍上，膈上連及肩背等疾，足三里可治膈下，臍下、小腹、胯膝諸病。兩個「三里」分工取治，有同而不同，不同而同之異。
臨床上手三里的穴位的作用也是極其廣泛的，處理治療落枕及扭傷，還可以用來治療牙痛，頜痛，痄腮、胃痛、腹瀉、高血壓、上肢麻痺、酸痛、癱瘓。
鄭氏醫集裡面是這麼認識手三里的的，因為手三里的針感特別強烈，所以用來治療小兒麻痺、癱瘓或肌肉萎縮，知覺遲鈍的首選穴。配臂臑做「穴位埋線」治療上肢麻痺和肌肉萎縮等。近代已將其作為治療高血壓、淋巴結核等病的常用穴。